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畜藥專家解析豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）

時間：2015-10-09 來源：迅達康獸藥

    畜藥專家表示，目前，在建立有效的預防、控制和消除豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）的方面，國家并沒有投資大量的財力和精力，那么，獸醫是如何看待PRRS的診斷呢？

    PRRS是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的母豬繁殖障礙以及各年齡豬呼吸道癥狀為主要特征的高度接觸性傳染病，該病在臨床上可引發病豬耳部發紺呈藍紫色，故俗稱“藍耳病”。它是危害全球養豬業的一大疾病，并且給全球養豬業造成巨大經濟損失，據估算，PRRS每年對美國養豬業造成的經濟損失達6.64億美元。

    為了應對PRRS的爆發，最為重要和關鍵的是開發可靠、準確和快速的診斷方法及程序。隨著技術的發展，獸醫和養豬行業相關者采取更可靠的診斷技術，以保持養豬業的健康發展為重中之重。

　　選擇合適的PRRS診斷方法

    依據診斷目的選擇合適的診斷方法。診斷目的包括：檢測豬場豬只感染狀況，確定該豬場此病毒流行現狀，確定豬場病毒暴露及疫苗使用情況或評估該豬場感染時間。診斷目的的確定，決定了我們應該選擇監測什么樣的豬只樣本，樣本的數量及豬只采樣。此外，值得注意的是，由于各豬只感染時間可能不同，所以豬只個體感染狀況是無法反應全群的感染現狀的。

　　選擇PRRS診斷的合適樣本的大小

　　PRRS診斷時，選擇合適大小的樣本量，是需要考慮很多因素的。比如，為了檢測到至少一個陽性樣本，則應考慮豬群的大小、預期的豬群疾病流行情況、檢測結果的準確性、檢測方法的敏感性和特異性。

　　檢測時間也很重要，感染和免疫的不同方面，如病毒血癥，病毒隱蔽期，抗體反應期，損傷期等，是在疾病發展的不同時間才出現的。

　　選擇正確的組織樣本

    目前，關于診斷，大致分為兩個方面：病毒抗原的檢測、宿主暴露于病毒情況的檢測。病毒抗原的檢測，需要收集病毒嗜性組織，如支氣管灌洗液、胸液、精液、血液、唾液或環境樣本，然而，病毒暴露情況的檢測，需要檢測血液、唾液或肌肉滲出液中PRRSV抗體情況。因此，診斷組織樣本的采集，是要依據很多因素才能確定的，包括特定的檢測目的，診斷方法的選擇及設備的具備情況。

　　診斷技術

　　在未成功分離PRRSV之前，該病的診斷主要靠病豬典型的臨床癥狀，特征性組織學病理變化，特別是間質性肺炎，當然要排除其它已知能引起豬繁殖障礙和呼吸道癥狀的病原。

　　目前常根據臨床癥狀、組織病理學變化、病毒的分離鑒定以及血清學方法等結果進行綜合診斷：

    （1）臨床診斷：因為PRRSV感染豬只后存在大量的亞臨床感染，故臨癥狀是診斷該病的首要條件。但是不同豬群發病后的臨床癥狀有所不同，只有暴發急性PRRS時，臨床診斷的意義才更大。

    （2）組織病理學檢查：在未發生繼發感染的情況下，感染豬只一般不發生明顯肉眼可見的病理變化，此時需要進行組織病理學檢查。組織病理學檢查主要適用于發病仔豬，對母豬、流產胎兒和育肥豬意義不大。豬感染PRRSV后典型的組織病理學變化是間質性肺炎，在感染豬只中，有時還會見到鼻炎、腦炎和心肌炎等組織病理變化。

　　（3）病毒檢測：用于病毒分離的細胞有原代PAM、CL2621和MARC-145。不同的毒株對不同的細胞有所選擇，但大多數毒株，特別是從血清中分離病毒都可用原代 PAM。根據病毒的培養特性，電鏡觀察，再綜合臨床癥狀及病理學檢測即可作出初步診斷。但還需要進行血清學方法和分子生物學方法進行確診。血清學技術主要包括免疫過氧化物酶單層試驗（IPMA）、間接免疫熒光抗體試驗（IFA）、血清中和試驗（SN）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、乳膠凝集試驗（LAT）、膠體金標記技術等，其中，IDEXX的ELISA技術是目前應用最廣泛的檢測PRRSV抗體的方法，間接免疫熒光抗體試驗（IFA）和血清中和試驗（SN）也經常被用到。常用的分子生物學檢測方法主要有反轉錄-聚合酶鏈式反應（RT-PCR）、套式PCR技術、實時RT-PCR、核酸探針原位雜交技術（ISH）及序列測定。利用RT-PCR方法可以特異性檢測血清、精液和組織中的病毒RNA。ORF5序列測定經常用來進行毒株鑒定和變異分析，且相關的數據庫已經建立。

　　公豬的血樣或精液，出生仔豬的臍帶，斷奶仔豬的血樣及死豬的組織病料均可用于PRRSV的實驗室診斷。近期的研究表明口腔分泌物是血樣外的另一樣品選擇。口腔分泌物是唾液和齦溝液的混合物，其比唾液更接近血樣。口咽分泌物的采集方便，安全且對動物沒有創傷。基于口咽分泌物的診斷方法包括ELISA，RT-PCR等。為提高檢測的敏感性，熒光微球免疫試驗可用于檢測口腔分泌物和血清中的不同抗原和抗體。在傳統的抗體檢測中主要檢測PRRSV的N蛋白抗體，但一些非結構蛋白，如Nsp1α、Nsp1β、Nsp2和Nsp7亦可作為診斷PRRSV感染的指標。

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畜藥專家解析豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）